LC-MS/MS metoder
Main content
Kjernefasiliteten for metabolomikk har etablert fire validerte LC-MS/MS-analyser. Hovedfokusområdet er analyter relatert til det endokrine systemet, slik som hormoner og legemidler som påvirker hormoners virkning.
Våre metoder er fullt ut validert i henhold til FDA-retningslinjene for følgende parametere: spesifisitet, presisjon, selektivitet, følsomhet, reproduksjonsevne og stabilitet.
Ultradian steroidhormonpanel
Den ultrasensitive ultradian-analysen måler androgener, kortikosteroider og gestagener i humant serum og mikrodialyseprøver. Denne unike metoden er utviklet for å benytte svært små prøvevolumer for å måle tidsseriebaserte steroidprofiler i interstitiell væske.
Prøvetyper og -volum: Humant serum (50 µL) og interstitiell væske (10 µL)
Analytter som måles: Testosteron, dihydrotestosteron, kortisol, kortison, aldosteron, 18-hydroksykortisol, DHEAS, 21-deoksykortisol, deksametason, kortikosteron, allo-tetrahydrokortisol, 11-deoksykortisol, tetrahydrokortisol, androstenedion, 17-hydroksyprogesteron, progesteron
Prøveprosessering: Væske-væske-ekstraksjon
LC-MS/MS-instrument: Waters Acquity UPLC I-Class med 2D-teknologi, Waters Xevo TQ-XS
Østrogener
Denne analysen kvantifiserer østrogener i humant serum og kan måle østradiolkonsentrasjoner ned til 1,2 pmol/L.
Prøvetyper og -volum: Humant serum, 300 µL
Analytter som måles: 17β-østradiol, østron, østriol, etinyløstradiol og østronsulfat
Prøveprosessering: Proteinutfelling, væske-væske-ekstraksjon
LC-MS/MS-instrument: Waters Acquity UPLC med 2D-teknologi, Waters Xevo TQ-S
Tamoxifen
Denne metoden kvantifiserer tamoxifen og 13 metabolitter i ulike humane og animalske matrikser. Metoden skiller kromatografisk mellom klinisk relevante isomerer av de aktive tamoxifenmetabolittene endoksifen og 4-hydroksytamoxifen.
Prøvetyper: Humant serum, plasma, beinmargsplasma, brystmelk og vev. Mus plasma og vev.
Prøvevolumer: 25 mg for vevsprøver og 20 µL for væskeprøver.
Analytter som måles: Tamoxifen, ND-tamoxifen, 4OH-tamoxifen (Z, E og Z-4'-isomerer), 3OH-tamoxifen, endoksifen (Z, E og Z,E-4'-isomerer), tamoxifen-N-oksid, NNDD-tamoxifen, Z-α-tamoxifen, cis-β-tamoxifen.
Prøveprosessering: Proteinutfelling (+homogenisering for vevsprøver).
LC-MS/MS-instrument: Waters Acquity UPLC Classic, Waters Xevo TQ-S.
Valideringen av metoden i ulike matrikser er publisert separat:
Ulipristal Acetate og Celecoxib
Denne analysen måler nødprevensjonsmiddelet ulipristal acetat (Ella) og celecoxib (Celebra), som er en smertestillende medisin i NSAID-klassen.
Prøvetyper og -volumer: Humant serum og museplasma, 20 µL
Analytter som måles: Ulipristal Acetat (varemerke: Ella), Celecoxib (varemerke: Celebra)
Prøveprosessering: Proteinutfelling
LC-MS/MS-instrument: Waters Acquity UPLC Classic, Waters Xevo TQ-S
Publikasjonen av metoden er under behandling. Vennligst kontakt thomas.helland@uib.no for valideringsdata.